2.6 凋亡基因 BCL-2、BTK 在 mRNA、蛋白水平的表达

与对照组相比，实验组 BCL-2、BTK 基因在 mRNA 和蛋白水平的表达升高，差异有显著性意义 (P < 0.05)。

3 讨论 

实验研究表明，多发性骨髓瘤的发生、发展与骨髓微环境密切相关，多发性骨髓瘤细胞与骨髓微环境可通过直接接触、自分泌及旁分泌细胞因子等方式相互作用 [9-10]。骨髓微环境包括多种基质细胞，其中间充质干细胞是骨髓中重要细胞之一。间充质干细胞是骨髓微环境中能自我更新并具有多向分化潜能的异种细胞群，对促进微环境中肿瘤的发生和发展起着关键作用。现阶段，使用间充质干细胞治疗血液系统性疾病已成为临床及科研人员关注热点，但是输注间充质干细胞治疗血液系统疾病也存在较大争议。该研究利用人骨髓间充质干细胞条件培养液解析骨髓间充质干细胞与多发性骨髓瘤细胞 RPMI8226 和 U266 之间的关系。收集第 3-5 代骨髓间充质干细胞条件培养液，其作用机制与其所含的细胞因子密切相关。研究发现，间充质干细胞条件培养液能在一定程度上恢复屏障相关细胞的活力和细胞间隙的紧密连接点。已有文献报道，间充质干细胞条件培养液通过促进细胞增殖、迁移、集落形成和抗凋亡作用进而促进癌细胞的发展。研究还发现，多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞分泌细胞因子与正常人明显不同，其分泌的细胞因子更能促进多发性骨髓瘤的发生发展。ZHANG 等 研究报道，骨髓间充质干细胞在骨髓微环境中 增强了多发性骨髓瘤细胞对化疗药的耐药性，促进了 U266 和 LP-1 细胞的侵袭和增殖。该研究 Edu 荧光染色和 MTT 增殖法结果显示，实验组 RPMI8226 和 U266 细胞活力大于对 照组，提示骨髓间充质干细胞条件培养液具有促进多发性骨髓瘤细胞系增殖的作用。

多发性骨髓瘤是一种 B 细胞来源的恶性浆细胞肿瘤涉及多细胞因子和信号传导调节，BCL-2 是重要的抗凋亡基因之一，已有研究表明 BCL-2 过表达参与了多发性骨髓瘤的发病进程，而且 BCL-2 基因表达上调与多发性骨髓瘤细胞寿命和其抗药性相关。BTK 是一种胞浆酪氨酸蛋白激酶，在血液肿瘤中高度表达，促进了肿瘤细胞的增殖和恶化。肿瘤的发生发展常与凋亡异常密不可分，线粒体是凋亡程序中起关键作用的细胞器。已有研究发现，BTK 是通过直接在线粒体水平上增加 BCL-2 依赖性来干扰血液恶性肿瘤细胞中固有的凋亡途径 。该研究通过骨髓间充质干细胞条件培养液处理 RPMI8226 和 U266 细胞，结果发现 BCL-2、BTK 基因和蛋白的表达水平明显高于对照组；流式细胞结果显示实验组的细胞总凋亡率低于对照组，且凋亡试剂盒 PI 荧光染色也显示实验组 RPMI8226 和 U266 细胞凋亡率低于对照组。

综上所述，骨髓间充质干细胞条件培养液促进多发性骨髓瘤细胞增殖途径可能是通过 BCL-2 和 BTK 高表达抑制细胞凋亡实现的。近年来，间充质干细胞用于治疗许多疾病并在相关领域取得重大成果，但间充质干细胞条件培养液与多发性骨髓瘤之间的交互作用还处在探索阶段，其具体的分子机制仍不清楚。该实验结果初步验证了骨髓间充质干细胞条件培养液与多发性骨髓瘤之间的关系，为多发性骨髓瘤寻找新的诊疗靶点提供实验依据。

参考文献：

1. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下 BeWo 细胞活力和紧密连接因子的表达. 中国组织工程研究 ,2021

2. 间充质干细胞条件培养液修复多种 疾病损伤的潜能. 中国组织工程研究 ,2019

3. 参与调节人脐带间充质干细胞对人白血病肿瘤细胞的生长抑制 . 北京 : 北京协和医学院 ,2011.