16、C_myc、Bcl_2蛋白随作用时间延长表达均下降，Bax蛋白表达上调。另外，CIK细胞活化后产生大量的炎性细胞因子，如IL_2、IFN_γ、TNF_α等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，还可通过调节机体免疫系统反应性间接杀伤肿瘤细胞。Verneris等认为，某些肿瘤细胞(如黑色素瘤、卵巢癌)通过FasL介导TIL、CTL凋亡而逃脱免疫清除，但对CIK细胞敏感，这是因为在CIK细胞诱导的过程中，由于IFN_γ等细胞因子的作用或/和活化诱导的细胞死亡(ACID)机制导致对Fas敏感的或已被活化的T细胞逐渐被选择性清除，最后诱导获得的CIK细胞便对Fas耐受。此外由于细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素_1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)的存在及Fas死亡区结合蛋白(FADD)水平很低，影响了死亡信号的传导，再加上CIK细胞高水平表达Bcl_2、Bcl_xL、DADI、survivin等抗凋亡基因，这些原因共同导致了CIK细胞可以耐受表达FasL的肿瘤细胞诱导的凋亡，从而对其进行有效的杀伤。国内研究者证实CIK细胞可以影响胃癌腹膜种植转移细胞的细胞周期,并具有诱导细胞凋亡的作用[8]。在Ewing＇s家族肿瘤细胞中，Verneris等发现CIK参与了CD3xHer2/neu双特异性抗体介导的细胞毒作用。又有研究者使用寡核苷酸序列刺激急性髓性白血病和非急性淋巴细胞性白血病细胞，发现刺激后CIK细胞中与蛋白合成有关的基因、信号转导相关基因以及与免疫应答相关基因均高表达，同时CIK细胞产生TNF_β增多。最后，靶细胞溶解阶段。在此阶段不依赖于效应细胞的存在，靶细胞溶解死亡。

6　CIK细胞的基础实验研究

    目前已经广泛开展了针对多种肿瘤细胞系和活体肿瘤组织应用CIK细胞的动物实验和临床前期试验，并有一些相关报道。Wolf等[11]在研究CIK细胞表面标志时发现：当培养14d时，CIK细胞的T细胞受体(86.5±5.7)％为TCR_α/β阳性， CD56阳性表达为(28.5±8.6)％，培养前后的CD56＋细胞增加1071倍，表明CD3＋CD56＋T细胞是CIK群体中主要效应细胞，Wolf和Lu[12-13]均发现CD3＋CD56＋的CIK细胞来源于CD3＋CD56－T细胞而非 CD3－CD56＋的NK细胞。表达CD56抗原的细胞大多起源于CD4－CD8＋细胞。Leemhuis等通过实验证实，CIK细胞在培养过程中，CD16＋CD56＋细胞<1％，CD3＋CD56＋细胞绝对数扩增290倍，说明CIK细胞发挥抗体依赖性的细胞介导的细胞毒(ADCC)作用的可能性很小。

     Flieger等[15]研究发现体外实验中CIK细胞对急、慢性髓系白血病的治疗效果得到肯定。Li等[16]将多药耐药基因(MDR_1)转入CIK细胞后，CIK细胞获得了多药耐药性,并且转染后的CIK细胞仍然保持原有的肿瘤细胞杀伤活性，这样CIK细胞的免疫治疗和化疗可以同时进行，从而扩大了CIK细胞治疗的应用范围。Linn等[17]在另一项研究中用正常供者的异体CIK细胞输注给白血病小鼠,该异体CIK细胞不诱导移植物抗宿主病(GVHD) ,而且可以延长荷瘤小鼠的生存期。该研究同时显示CIK细胞可以与树突状细胞(DC) 相互作用增加细胞的抗瘤活性。Nagaraj[18]将包含人IL_2基因片段的重组质粒用电穿孔法导入CIK细胞，并与细胞DC共同孵育后治疗胰腺癌，体外检测发现转染后CIK细胞在增殖率和细胞杀伤活性上均高于未转染细胞。Zhang等[19]研究发现从原发性肝细胞癌患者获得的CIK细胞对多药耐药性细胞系Bel_7402/R具有很强的细胞毒作用。

7、CIK细胞在肿瘤治疗方面的研究

    CIK细胞等过继免疫疗法可以在不损伤机体免疫系统和功能的前提下，直接杀伤肿瘤细胞。同时在调节和增强机体的免疫功能、清除微小残余病灶方面等方面也发挥着重要作用，因而成为肿瘤手术、放化疗的重要辅助手段，为预防肿瘤复发，改善晚期患者的生存质量提供了新途径。

7.1 CIK细胞治疗肝癌

    Zhou QM等在85名接受过微创治疗的肝细胞癌患者中观察CIK的疗效，发现微创技术治疗后再用CIK治疗能提高肝癌患者的免疫力，减少癌症的复发。Zhao等应用肝动脉栓塞化疗（TACE）序贯联合CT引导下射频消融（RAF）治疗和CIK的新型模式治疗原发性肝癌，显示可明显降低乙肝病毒含量或消除乙肝病毒，阻断致癌因素，提高治疗疗效。

7.2 CIK细胞治疗肾癌

    CIK细胞免疫治疗对肾癌和淋巴瘤具有较好的应用前景，国内专家用CIK细胞治疗14例术后转移的Ⅳ期肾癌患者，结果显示3个周期以上的总有效率可达44.8%，平均生存期为19.36个月。并且，由于CIK细胞治疗不使用大剂量IL-2，因此在治疗过程中，出现低血压和血管外漏综合征等严重副作用的可能性大大降低，患者耐受性提高，值得进一步深入研究。

7.3 CIK治疗肺癌

    Li等[24]对42例I-IIIa NSCLC的术后患者，分为单纯化疗组和化疗联合DC/CIK细胞组，DFS和OS作为评价标准，应用乳酸脱氢酶的方法检测CIK细胞抗肿瘤活性。结果显示：经DC激活的CIK细胞的抗肿瘤活性明显提高，CIK细胞组2年生存率比单纯化疗组有明显提高（94.7 +/- 3.6% versus 78.8 +/- 7.0%, P < 0.05），两组的DFS无统